压力蒸气灭菌锅检测标准操作规程

目  的:建立压力蒸气灭菌锅检测标准操作规程。 范  围:适用于压力蒸气灭菌锅周期检测。 责任人:质量管理部QA员。 内  容: 1 试剂准备 
1.1 嗜热脂肪杆菌芽孢(SS1,K31)含菌量为5×105~5×106cfu/片,121℃下,杀灭90%微生物所需时间D121值为1.3~1.9min,杀灭时间(KT值)为≤19min,存活时间(ST值)为≥3.9min。 
1.2 溴甲酚紫酒精溶液: 
1.2.1 取溴甲酚紫2.0g,溶于100mL95%乙醇中。 
1.2.2 溴甲酚紫蛋白胨水培养基配制:蛋白胨10.0g,葡萄糖5.0g,溶于1000mL蒸馏水中,调pH值**7.0~7.2,然后再加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6mL,摇匀后,按5mL/管,分装包口,置压力蒸汽灭菌器中,于115℃灭菌40min后备用。 
2 检测方法 
2.1 手提式高压灭菌锅将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入试管内(试管口用牛皮纸包封)。通气灭菌盒内盛满中试管,把带有指示菌片的两只试管放于中心部位灭菌,将通气灭菌盒平放于高压灭菌锅底部或中层。 
2.2 下排气式高压灭菌锅将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌包中心部位,将灭菌包放于高压灭菌锅排气孔上部。 
2.3 经一个灭菌周期后(121ºC,30分钟)取通气灭菌盒或灭菌包中装有指示菌片的试管或菌片,在无菌条件下,投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,同时将未经灭菌的指示菌片投入另一管培养基中作为对照,56℃培养48h,观察培养基颜色变化。 
2.4 重复2.1~2.3三次。 3 结果判定 
3.1 验证检测中,通气灭菌盒或灭菌包内,每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基全部不变色,判定为灭菌合格。指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基由紫色变为黄色时,判定为灭菌不合格。4 验证确认 
消毒验证程序,**少需进行3次灭菌验证。3次结果**一致,才能确认此次消毒验证的可靠性和可行性。在灭菌设备变更的情况下,**进行再验证。正常情况下,每年应做到2次周期性的消毒验证确认。