3种方法验证小型预真空灭菌器的灭菌效果

口腔器械中牙科手机是**具代表性的管腔类器 械,又因其内部结构复杂,常存在回吸污染等问题,     一直是众多医务工作者研究的重点。病毒对高温高 压耐受性低,一般在经过一个灭菌周期后均能被灭 活 。 本次研究选择具有一定抗力的嗜热脂肪杆菌芽                                     孢对牙科手机进行人工染菌,并对应使用化学PCD 和模拟生物PCD同时进行监测,验证小型预真空灭   菌器不同程序的灭菌效果 从而为灭菌监测工作提               ,     供更为有力的科学依据。    
材料与方法                  
                           
                           
1.1 材料                      
1.1.1 试验用物   德** MEALG 公司生产的24B
小型预真空灭菌器,   微量注射器、牙科手机。
              100l      
                  μ        
1.1.2 监测用物   德** GKE 公司生产的过程验
证装置( )、第 类化学指示物;试验用嗜热脂肪
    PCD                  
杆菌芽胞悬液           ,浓度为   / ,
        ATCC7953   1×10CFUml
                           
      饱和 蒸 汽 条 件 下, 值 为 1.3~
121±0.5 ℃                
    ,存活时间       ,杀灭时间   ,购于
1.9min         3.9min   19min
解放军军事医学科学院消毒检测中心; 公司提
                        3M  
                           
供的自含式生物指示物。        
1.2 方法
 
1.2.1 牙科手机染菌 在无菌工作台中,使用微量注射器将1×10 CFU/ml芽孢悬液注射到牙科手机气路腔体内,采用37℃烤箱烘干30min,然后使用一次性纸塑袋包装。未灭菌前对染菌的牙科手机进行芽孢回收率检测 3 次,每次回收芽孢菌
 
1×10 CFU/ml。在无菌工作台中,制备 1×10
CFU/ml芽孢悬液,使用微量注射器将20l芽孢悬
μ
 
液(1×10 CFU/ml)注射到牙科手机气路腔体内,采用37 ℃烘干30min,然后使用一次性纸塑袋包装。进行灭菌实验前对染菌的牙科手机,进行芽孢回收率检测 3 次,每次回收芽孢菌均 >1×10
 
CFUml
1.2.2 模拟生物PCD制作 一部分使用牙科金属器械盒,长、宽、高分别为10、4、5cm,内装生物指示物,加盖金属盒盖;另一部分将生物指示物放于纸塑包装袋内密封。两种模拟生物PCD各30个。
 
1.2.3 观察并记录 将内装五类化学指示物的化学PCD、内装生物指示剂的模拟生物 PCD 和染菌的牙科手机各一个,放置于小型灭菌器灭菌舱内的排气口上方,经过一个灭菌周期后,取出化学PCD、生物PCD和牙科手机。化学PCD直接观察结果并记录;生物指示物按照使用说明书进行培养,并同时做阳性对照,48h后观察培养结果并记录。牙科手机灭菌后送北京市疾病预防控制中心进行无菌检测,每批送检牙科手机中含1支不经过灭菌程序的阳性对照。以上方法分别对小型预真空灭菌器通用程序和快速程序进行监测,两个程序灭菌时间
 
3.5min、温度134℃、压力2ka均相同,通用程序为3次预真空,快速程序为1次预真空。每个程序重复各30次。
 
2 结 果
 
生物PCD监测在两个程序的60个测试中均获通过,3个阳性对照的生物指示物检测阳性。60支
 
被染菌牙科手机灭菌后未检测出真菌、需氧菌和厌氧菌检测证号2010XD-Y001516181920),3支
 
阳性对照牙科手机检测出需氧菌、厌氧菌,其中1支阳性对照牙科手机还同时检测出真菌。化学 PCD监测在通用程序测试中28个获通过,快速程序中均未获通过。以上测试证实小型预真空灭菌器的两个不同程序均能使牙科手机达到无菌。通过两种验证性监测可以看出,生物 PCD 通过率明显高于化学PCD监测。小型预真空灭菌器的快速程序为一次预真空,30个化学PCD 在这个灭菌程序中均未获通过,但生物PCD 和染菌牙科手机均获通过,表明化学PCD 监测安全系数高。化学PCD监测通过可以代表**难灭菌的管腔类器械达到灭菌水平。见表1。
 
表1 两个灭菌程序的3种验证监测结果(%)
 
Table1 Resultsmonitoringtwosterilizationprocessesbythreemethods
灭菌 测试 化学 PCD 监测 生物 PCD 监测 牙科手机无菌检测
                 
程序 数   通过数 通过率  通过数 通过率  合格数  合格率
                           
快速程序 30   0.0   30 100.0 30 100.0
     
通用程序 30 28   93.3   30 100.0 30 100.0
     
阳性对照       0.0 0.0
 
 
3 讨 论
 
我**开展口腔诊疗服务的机构很多,口腔诊疗器械消毒灭菌管理工作参差不齐。经济条件较好的地区和机构能够按照**家要求进行器械消毒灭菌的各项监测。但大部分口腔诊所、一级社区保健机构等缺乏生物监测的条件和专业人员。如何保障口腔诊疗器械灭菌质量和医疗安全是一些小型口腔医疗机构面临的难题。
 
小型预真空灭菌器在口腔器械消毒灭菌中应用较为广泛。各使用单位对灭菌器灭菌负载范围和灭菌效果监测方法选择各不相同。灭菌负载范围和灭菌监测方法选择不当会导致器械灭菌失败,影响医疗质量。小型蒸汽灭菌器按照 EN13060标准可分为3个灭菌周期,分别是B、N、S级:B级可以对各种包装和管腔类器械进行灭菌;N 级只能对无包装的实心器械进行灭菌;S级可灭菌 N 级灭菌负载范围,对于其他类别物品的灭菌需根据制造商提供的灭菌负载范围进行选择。目前大部分制造商未提供
 
S级可灭菌管腔类器械的种类和验证方法。本次试验选择小型预真空灭菌器的两个灭菌程序,通用程序对应B 级,快速程序对应S级。按照ISO15882
 
标准说明指示物应该放于器械内部**难灭菌的位置,口腔器械中牙科手机是**具代表性的器械,其**难灭菌的位置是管腔内部。通过使用染菌牙科手机、生物PCD、化学PCD同时对小型预真空灭菌器两
 
个不同程序的灭菌效果进行验证,可以进一步证明物品经过灭菌过程在**坏的状况下是否达到无菌。
 
化学PCD验证是对于灭菌过程构成特定抗力的装置,用于评价灭菌过程的有效性。PCD 内装化学指示物就被称为化学PCD,内装生物指示物被称为生物PCD。PCD内装的第5类化学指示物是可以对灭菌周期规定范围内的所有评价参数起作用,其标定值是可以达到规定的灭菌要求所具有的生物额定值和[1]。本次化学PCD对小型预真空灭菌器的两个程序的测试结果显示:通用程序通过
 
93.3%,快速程序均未通过。试验表明,小型预真空灭菌器通用程序根据化学PCD 监测结果放行灭菌物品,其安全系数高[2]。快速程序则不适于选择化学PCD监测。
 
生物PCD验证小型压力蒸汽灭菌器无标准生物监测包,本次试验选择常用的、有代表性的牙科器械盒和纸塑包装袋制作成生物PCD,对小型预真空灭菌器进行监测。两个灭菌运行程序中生物 PCD
 
均获通过。结果显示,日常监测中两个程序均可选择模拟生物PCD进行监测。
 
染菌牙科手机验证产品直接染菌适合评估产品的可灭菌性、器械中较难灭菌的部位的证实,**难灭菌的部位就是对灭菌工艺具有**大抗力的位置。试
 
验结果证实60支染菌牙科手机在经过30个通用程序和30个快速程序的灭菌周期后,经检验无菌生长。说明小型预真空灭菌器的两个程序均能够灭菌牙科手机。牙科手机的灭菌可以代表其他同等结构管腔类器械和非管腔类口腔器械,在选择以上两种程序时均能够被灭菌。

通过3种验证方法结果显示,化学PCD是**难通过的验证方法,它不仅能够监测**难灭菌的包裹,而且可以监测到腔体内部的灭菌情况[3]。基本符合查捷等[4]在小型压力蒸汽灭菌器PCD 监测结果中B型灭菌器化学PCD监测合格率77.8%,S型灭菌器化学PCD监测均不合格,生物PCD 监测全部合格的研究。模拟生物PCD 监测和染菌牙科手机在两个程序中均获通过,说明一定量的微生物在经过一个灭菌周期后均能够被杀灭。通过以上监测结果,对于不具备生物监测的医疗机构以及不能等到生物监测的培养结果就需要使用已灭菌的器械来说,可以选择化学PCD作为常规通用程序监测。